|  print

Improvements in the method for detection of Salmonella spp. in animal faeces
[ Verbeteringen in de methode voor de detectie van Salmonella spp. in dierlijke faeces ]
 
Veenman C, Korver H, Mooijman KA

57 p in English   2007
RIVM rapport 330300010
download pdf (386Kb)  

Toon Nederlands

English Abstract
The international standard method (ISO 6579) for the detection of Salmonella in food and animal feed is less applicable to faecal samples of poultry and pigs. RIVM's investigation on how to adapt the method for application to the detection of Salmonella in animal faeces has resulted in a new annex (Annex D) to the existing international culture method (ISO6579).
RIVM advises against the mixing of faecal samples with glycerol, a substance that stabilises bacteria when stored in a freezer, as a means to stabilising Salmonella. However, since research has shown that glycerol inhibits the growth of Salmonella, it is advisable to store the faecal samples in the refrigerator and analyse them as soon as possible for the presence of Salmonella.
Research was also preformed to further improve two steps of the detection method. In the first step, faecal samples are incubated in buffered peptone water (BPW) at a standard incubation time of 18 h. However, shortening of the incubation time did not improve the method. Another test was performed to ascertain whether a higher dilution of the sample in the BPW would bring forth more positive results. However, this was not the case.
In the second step of the method, a small volume of the incubated BPW is further incubated on a more selective medium for Salmonella, called Modified Semi-solid Rappaport Vassiliadis (MSRV). Our investigation showed that a lower concentration of the antibiotic novobiocin in MSRV resulted in better growth of Salmonella. For faecal samples originating from pigs even more positive results were found at this lower concentration.

 

RIVM - Bilthoven - the Netherlands - www.rivm.nl

Display English

Rapport in het kort
De internationale standaard methode (ISO 6579) om Salmonella te meten in voeding is minder geschikt voor uitwerpselen (faeces) van kippen en varkens. RIVM heeft onderzocht hoe de methode kan worden aangepast om Salmonella goed in dierlijke uitwerpselen te kunnen meten. Dit heeft geresulteerd in een nieuwe bijlage (Annex) bij de bestaande internationale meetmethode (ISO 6579).
Voor het stabiliseren van Salmonella in dierlijke uitwerpselen raadt RIVM af om de uitwerpselen te mengen met glycerol. Glycerol is een middel om bacterien bij invriezen stabiel te houden. Uit onderzoek blijkt echter dat glycerol de groei van de salmonellabacterien remt. Het is beter om de uitwerpselen te bewaren in de koelkast en zo snel mogelijk te onderzoeken op de aanwezigheid van Salmonella.
Het onderzoek ging ook in op andere aspecten om twee stappen van de meetmethode te verbeteren. Bij de eerste stap worden de uitwerpselen gekweekt in gebufferd pepton water (BPW). De standaard kweektijd is 18 uur. Het verkorten van deze kweektijd bleek geen zin te hebben. Ook werd getest of een verdunning in een oplossing met BPW meer positieve resultaten opleverde. Dit bleek echter niet het geval.
Bij de tweede stap van de methode wordt een klein volume van de gekweekte BPW verder gekweekt op een voor Salmonella meer selectief medium: Modified Semi-solid Rappaport Vassiliadis (MSRV). Een lager gehalte van het antibioticum novobiocine in MSRV bleek betere groei van Salmonella op te leveren. Voor uitwerpselen van varkens bleek dit zelfs tot meer positieve resultaten te leiden.

 

RIVM - Bilthoven - Nederland - www.rivm.nl
Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu RIVM
( 2007-07-27 )