Rapport in het kort
Quil A is de naam voor een saponinemengsel dat gewonnen
wordt uit de bast van de Quillaja Saponaria Molina. In een concentratie van
0,3 of meer g/l vormen deze saponines micellen, die de basis vormen voor
"immunostimulating complexes" (iscoms). In dit rapport wordt het onderzoek
beschreven dat gedaan werd voor de ontwikkeling van een analytisch-chemische
methode om de verschillende componenten van het Quil A preparaat "Spikoside"
te scheiden en te kwantificeren. Dit gebeurde ten behoeve van een onderzoek
naar de immunogene en toxische eigenschappen van iscoms. Er werd een
hogedruk-vloeistof-chromatografische (HPLC) methode met gradientelutie
ontwikkeld, waarmee de belangrijkste componenten van het Spikoside werden
gescheiden en waarbij de chromatografische pieken werden geintegreerd.
Tevens werd op een semi-preparatieve kolom 1 mg Spikoside gescheiden, het
eluens werd in gelijke fracties opgevangen en de fracties werden op
hemolytische activiteit getest. Hierbij bleek dat 90% van de hemolytische
activiteit wordt veroorzaakt door de groep pieken die in het laatste deel
van de gradient elueert. Deze semi-preparatieve scheiding werd enige malen
herhaald, de drie belangrijkste pieken werden afzonderlijk opgevangen en de
eluaten werden gevriesdroogd ten behoeve van een morfologisch en chemisch
onderzoek van iscomstructuren op de afdeling Geinactiveerde Virus
Vaccins.
